摘要: | 研究了两种高灵敏度的光谱测量仪的方法,用于测量来源于由黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶反应或者添加了NADH的骨骼肌肌质网囊泡产生的KO2和O2.-过氧化离子自由基。这些方法允许量化过氧化离子的浓度通过监视它和4-氯-7-硝基苯并-2,1,3-苯并氧杂恶二唑或者通过记录最后反应物在波长470纳米的吸光度或者测量用波长470纳米的光照射激励后它散发出来的波长550纳米的荧光强度活跃产品的消光系数被确定为4000。通过在4-氯-7-硝基苯并-2,1,3-苯并氧杂恶二唑或者二氧化钾中的停流之间的分析,我们得到了一个下限为1的双分子速率常数。吸光率和过氧化物浓度的对应关系的图在2-200muM的范围以上是成线性的,而更高灵敏度的荧光测量可以获得了最低测量极限为100nM的亚微摩尔量级的浓度。与其它现在广泛使用的测量过氧化物(例如:氮蓝四唑)方法相比,这种新的光谱光度测量方法在实验中表现出了非常好的重复性。实验结果和总所周知的几种试样(例如:酰化了的铁细胞色素和XTT钠盐)的相关系数是一致的。同时对这种新的过氧化物离子测量探针的优点和缺点进行了详细的讨论。 |